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小鼠ELISA试剂盒的操作步骤是怎样的?

 更新时间:2024-01-21 点击量:349
  小鼠ELISA试剂盒是一种用于检测小鼠样本中特定抗原或抗体的试剂盒。这些试剂盒通常采用酶联免疫吸附法(ELISA)技术,通过对小鼠样本进行处理和孵育,与特异性抗体结合,再通过洗涤和显色等步骤,最终通过检测仪器进行信号的定量或定性分析。
 
  小鼠ELISA试剂盒的操作步骤如下:
 
  1、准备样品:根据实验需要,采集小鼠血清或组织样本。如果使用血清样本,需将血液收集到适当的抗凝管中,并在室温下静置一段时间,使血液凝固后离心获取血清。如果使用组织样本,需将组织进行研磨或匀浆处理,以释放细胞内的蛋白质。
 
  2、标准品制备:根据试剂盒说明书中提供的浓度范围,制备一系列不同浓度的标准品溶液。通常,标准品的浓度范围应涵盖待测样品中可能的白介素水平。
 
  3、加样:将标准品和待测样品分别加入到相应的微孔板中。每个标准品和待测样品都应在微孔板的多个孔中重复。确保每个孔中的体积一致,以避免误差。
 
  4、孵育:将微孔板密封,并放入孵育器中,在特定的温度和时间条件下孵育。孵育的目的是让标准品和待测样品与试剂盒中的抗体发生特异性结合。
 

小鼠ELISA试剂盒

 

  5、洗涤:孵育结束后,将微孔板取出,并用洗涤液洗涤几次,以去除未结合的物质。洗涤液应充分冲洗每个孔,以确保没有残留物。
 
  6、酶标记抗体添加:将酶标记抗体添加到微孔板中,并与标准品和待测样品中的抗原结合。酶标记抗体是一种能够与特定抗原结合的抗体,其上连接有酶标记物。
 
  7、再次孵育:将微孔板再次密封,并放入孵育器中,在特定的温度和时间条件下孵育。孵育的目的是让酶标记抗体与抗原发生特异性结合。
 
  8、底物反应:孵育结束后,将底物溶液添加到微孔板中,并与酶标记抗体上的酶标记物发生反应。底物溶液通常是一种特殊的化合物,当酶标记物与其结合时会发生颜色变化。
 
  9、终止反应:在一定的时间后,添加终止液到微孔板中,以终止底物反应。终止液可以阻止进一步的颜色变化。